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技術支持

戊巴比妥鈉半數有效量(ED50)的測定

時間:2018-09-13來源:本站作者:玉研儀器

一、 實驗目的和原理
測定戊巴比妥鈉( 57-33-0) 腹腔注射對小鼠催眠作用的 ED50值。 戊巴比妥鈉為巴比妥類鎮靜催眠藥,
用適當劑量給小鼠腹腔注射后產生的催眠效應, 常用翻正反射的消失來判斷, 該指標僅有陽性( 睡眠) 和
陰性( 不睡眠) 兩種現象, 屬于質反應。 質反應量效曲線的橫坐標為對數劑量, 而縱坐標采用陽性反應發
生的頻數時, 一般為常態分布曲線。 如改用累加陽性頻數為縱坐標時, 可以得到標準的 S 型曲線。 該曲線
的中央部分( 50%反應處) 接近一條直線, 斜度最大, 其相應的劑量也就是能使群體中半數個體出現某一效
應的劑量, 通常稱為半數效應量。 如效應為療效, 則稱半數有效量( ED50) ; 如效應為死亡, 則稱半數致死
量( LD50) 。 這些數值是評價藥物作用強度和藥物安全性的重要參數。 021-51602548
孫氏改進的 Kaerber 法的設計條件是: 各組實驗動物數相等, 各組劑量呈等比數列, 各組動物的反應率大
致符合常態分布。 若以 Xm 為最大反應率組劑量的對數, i 為組間劑量比的對數, p 為各組反應率, Pm 為最
高反應率, Pn 為最低反應率, n 為實驗組數, 則:
ED50= lg-1[Xm- i( ∑ P- 0.5) + i/4( 1- Pm- Pn) ]
含 0%及 100%反應率時,
ED50= lg-1[Xm- i( ∑ P- 0.5) ]
ED50的 95% 可信限= lg-1( lgED50± 1.96· S)
其中 S= i


二、 實驗材料
小鼠 50 只, 1% 戊巴比妥鈉( sodium pentobarbital solution) 小鼠籠, 天平, 0.5ml 或 0.25ml 注射器。

三、 實驗步驟
1、確定給藥劑量:先以少量動物做預實驗,以獲得小鼠對戊巴比妥鈉催眠反應率為 100% 的最小劑量( ED100)
和反應率為 0% 的最大劑量( ED0) 。 然后在此劑量范圍內, 按等比數列分成幾個劑量組( 一般 4~ 8 組) ,
各組劑量的公比( r) 為 r= n-1√ ED100/ED0
求得 r 后, 自第一劑量組( ED0) 開始乘以 r, 可得相鄰的下一個組的劑量。 若共分為 5 個組, 各組劑量分
別為 ED0、 r· ED0、 r2· ED0、 r3· ED0、 r4· ED0、 r5· ED0。
2、 給藥: 取體重 25g 左右的健康小鼠 50 只, 查隨機數字表, 隨機分為 5 個組, 每組 8 只(除去極端重量小
鼠 2 只)。 按表 1 所列的各組給藥濃度分別腹腔注射 0.1ml/10g。
3、 記錄結果: 以翻正反射消失為入睡指標, 觀察藥物的催眠效應, 記錄各組腹腔注射后 15min 內睡眠鼠數,
填入表 1。

四、 實驗結果
表 1 計算戊巴比妥鈉 ED50用表


根據表 1 的數據和上述公式可求得 ED50=31.90

注意事項
1、 為減少誤差, 由 1 人配藥
2、 保持環境安靜
3、 如果第一組出現陽性動物, 則向下按公比增加一個低劑量組(d0=d1/r)
4、 最后一組動物未全部陽性, 向上增加一個劑量(dk+1=dkr)


實驗動物的麻醉方法,除了使用戊巴比妥鈉進行注射麻醉,還可以選擇使用異氟烷氣體麻醉:

小動物氣體麻醉機


動物保溫系統


動物體溫維持儀(電熱型)對手術中的動物和術后恢復的動物進行保溫,并可進行動物體溫測量。



 

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